Dev Cell :利用谱系示踪技术无缝隙捕猎体内转移中的EMT过程

2021-11-29 02:52:31 来源:
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帕金森氏症是妇女群体的最高发癌症,威胁着妇女病征的保护。病变帕金森氏症病征在进行原处切除手术治疗后加以适当的放疗或者化疗,较强较好的高血压结果。然而由于帕金森氏症线粒体丧失了正常的线粒体特性,线粒体彼此在在的连接变得松散,难以破损,进入血液该系统或者淋巴该系统进行移往,在可执行人体器官,如肺,骨,肺等人体器官处构成移往圹,威胁病征心灵。因此对于帕金森氏症移往方式及其机理的研究者本质相当程度。

移往的线粒体应该引发上皮线粒体向在在充质线粒体的变换(epithelial-mesenchymal transition, EMT)长期以来是研究者层面的众多热点。并且近些年来对于移往步骤中所的EMT的作用相反于争议。EMT步骤中所,上皮线粒体得不到其特有的免疫学特征,得不到线粒体极性,得不到与基底膜的连接而被赋予一些在在充质线粒体的特性,线粒体共通点椭圆形纺锤形,较强尤其强的移至和蹂躏能力,较强抗凋亡和降解线粒体外基质的能力。中后期的研究者为了让体外线粒体培养以及移植的方法认为EMT步骤对于线粒体的移往较强最重要的作用,但相反直接的体外物理证据,近几年却学术界提议体外线粒体的移往不只能EMT步骤。因此,线粒体的移往应该引发上皮线粒体向在在充质线粒体的变换有待进一步研究者显然。

中所国科学知识院分子会线粒体科学知识卓越创意中所心周斌研究者组在Developmental Cell时代周刊上在线撰写了文章“Genetic Fate Mapping of Transient Cell Fate Reveals N-cadherin Activity and Function in Tumor Metastasis”。该研究者成果提示在帕金森氏症移往步骤中所,线粒体的上皮线粒体向在在充质线粒体变换较强异质性,原处线粒体会引发N-Cadherin相反的EMT,并且引发N-Cadherin相反的EMT的线粒体重大贡献构成了基本上的肺移往圹,而原处引发Vimentin相反的EMT的线粒体并没有重大贡献构成肺移往圹,该工作为帕金森氏症移往的临床防疫提供了最重要基础信息和新的研究者方向。

传统的相反Cre-LoxP的单就是指重新分配由此可知示踪技术虽然可以在体说明了线粒体境况,但一般示踪的是他莫昔芬诱导时标示的那群线粒体,并且标示的这些线粒体的分子会标示一般是在线粒体中所保持稳定表述的,而诱导型的单就是指重新分配体统难以捕获体外这些震荡表述的性状。因此单就是指重新分配该系统不适可用示踪静态中所震荡的、可逆的EMT步骤。在本研究者建设项目中所,周斌研究者组科研技术人员基于双就是指重新分配该系统成立诱导型的无缝隙由此可知示踪技术,以自发性帕金森氏症静态果蝇MMTV-PyMT为研究者对象,为了让Kit-CreER来标示果蝇腺体管腔上皮线粒体,构建可用示踪EMT的性状敲入果蝇N-Cad-LSL-Dre和Vim-LSL-Dre,为了让双就是指报告性状果蝇NR1来同时示踪引发过和尚未引发过EMT的腺体线粒体。

首先研究者技术人员基于中后期的双就是指重新分配该系统,建立了可用在体捕获EMT的诱导型无缝隙遗传学由此可知示踪技术,即EMTracer该系统。为研究者腺体线粒体移往步骤中所的EMT,研究者技术人员将Kit-CreER;EMTgene-LSL-Dre;NR1( EMTracer果蝇,EMTgene可以是一些公认的在在充质线粒体的分子会标示,例如Vimentin和N-cadherin)与自发性帕金森氏症静态果蝇MMTV-PyMT配在一起,经他莫昔芬诱导后,Kit-CreER表述的Cre定位报告性状NR1和EMTgene-LSL-Dre两个性状上的LoxP底物引发就是指重新分配。Kit-CreER与报告性状NR1的LoxP引发重新分配,使Kit+的腺体管腔上皮线粒体被标示上黄色红光肽(ZsGreen),可以由此可知示踪Kit+的上皮线粒体在腺体稳态维持中所的线粒体境况。Kit-CreER与EMTgene-LSL-Dre的LoxP引发重新分配,使介于两个LoxP彼此在在的stop数列被切掉,当引发上皮线粒体向在在充质线粒体的变换后,EMTgene就会启动表述,使EMTgene后面的Dre表述出来,与报告性状NR1的Rox引发就是指重新分配,使报告性状NR1位于两个Rox底物彼此在在的Rox-LoxP-stop-LoxP-ZsGreen-PolyA-Rox数列被切掉,从而启动金色红光肽(tdTomato)的表述,使引发过EMT的线粒体由之前的黄色红光肽(ZsGreen)变成金色红光肽(tdTomato),意味着对EMT的天气预报。并且,EMTgene-LSL-Dre的stop数列被切掉以后,Dre将长时在在表述,尽管EMT步骤可以是震荡的、可逆的,为了让EMTracer果蝇可以意味着对EMT步骤的长时在在天气预报,毕竟了诱导型CreER在天气预报EMT步骤的缺陷,研究者技术人员通过查阅早期及晚期的原处和肺民间组织进行免疫红光皮肤上分析线粒体中所的EMT情况,同时通过可扩展分选将引发过N-Cadherin相反的EMT的腺体原处线粒体分选出来发现这些线粒体高表述在在充质线粒体的分子会标示和转录因子。并且这些引发过N-Cadherin相反的EMT的腺体原处线粒体在体外培养较强更强的蹂躏能力。

其次,研究者技术人员研究者技术人员还为了让N-Cad flox果蝇在腺体原处线粒体中所特异性敲除N-Cadherin,会减肺移往圹的构成,而Vimentin全敲的腺体果蝇直到现在可以构成肺移往圹。

该研究者结果提示在帕金森氏症线粒体移往的步骤中所,线粒体的EMT较强异质性,并且本研究者中所成立的诱导型无缝隙由此可知示踪技术也可以可用发育或者其他静态中所EMT的研究者。

据闻,该研究者工作是由普林斯顿大学李燕,博士生吕赞等在周斌研究者员的指导下完成。该研究者给予了复旦的大学施奇惠博士,暨南的大学蔡冬青博士,Albany的大学吴明福博士,上海营养卫生所胡国宏研究者员,香港中所文的大学吕爱兰博士,南方医科的大学冯景博士及安达卢西亚神经细胞研究者所Angela Nieto博士的大力协助。

早期出处:

Yan Li, Zan Lv, Shaohua Zhang,et al.Genetic Fate Mapping of Transient Cell Fate Reveals N-Cadherin Activity and Function in Tumor Metastasis.Dev Cell. 2020 Jul 2;S1534-5807(20)30500-1. doi: 10.1016/j.devcel.2020.06.021.

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