时隔3年后，韩春雨发布月所科研成果论文

时隔3年，曾处于舆论漩涡的韩风雨公开了一项最新篇文章。近来，韩风雨在亦同刻印的网站BioRxiv上刊出了一篇关于基因编辑的新文章：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。文章共有5名写作者，由南向北为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，工作单位均为沧州新材料学院基因编辑深入研究里面心。其里面，韩风雨为通讯设备写作者。据了解，篇文章里面提过的CasE是Ⅰ-E型 CRISPR酶的核心成分，它通过混合特定的茎环区域内单独处理pre-crRNA，称之为 CasE Binding S，简写为CBS。CasE保守His20参与催化活命性，ΔHis26-TtCse3等位基因的CasE（dCasE）则失去了催化活命性，但仍然与其靶标紧密混合。在该深入研究里面，通过将 split 发射光谱与dCasE的N末端和C-末末端（ΔHis20）融合，构建了活命体RNA工具VN-dCasE-VC。该控制系统仅在长期存在靶RNA亦同发出发射光谱，从而增爆冷信噪比。在活命巨噬细胞里面进行仿真的RNA，不需要特定的亚巨噬细胞分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T巨噬细胞里面的高水平解读和均匀分布表明CasE和dCasE适当于活命巨噬细胞里面的RNA操纵。为了次测试CasE在灵长类动物巨噬细胞里面解读时确实具爆冷活命性，写作者构建了“关闭”报告基因核糖体CBS-GFP-N1。它由5′-UTR里面的GFP mRNA和CasE混合核苷酸（CBS）组成。当CasE被引入控制系统时，GFP解读水平急剧下降。同时，为了进一步次测试CasE活命性，写作者还构建了“触发”报告基因核糖体RED-16×CBS-Lin28-C1，其里面CBS填入RED多肽基因的3′-UTR区和Lin28的上游。Lin28是RNA核保持一致回波，在其3′-UTR里面具lin28回波的RED多肽mRNA几乎不能写成蛋白质。CBS-CasE依赖举例来说切断lin28回波并从核释放靶mRNA用以翻译（图1E和图1F）。这些表明CasE可以混合并切割灵长类动物巨噬细胞里面的CBS。另外，为了将dCasE-CBS相互作用设计到RNA控制系统里面，写作者通过将split-FP5-7与dCasE蛋白混合。发现一个版，即VN-dCasE-VC很难发出发射光谱，这意味著是由于不正确的折叠或不稳定的情况下，但是当与靶RNA（CBS）混合时，可以在发射光谱孔径下清楚地捉到发射光谱回波，即使VN-dCasE-VC解读核糖体的转染浓度非常低。接下来，写作者适用VN-dCasE-VC控制系统灵长类动物巨噬细胞里面过解读的β-磷酸化（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC控制系统在巨噬细胞质里面揭示出爆冷发射光谱。此外还捕捉到到，向靶mRNA掺入更是多CBS可改善回波，发射光谱更是清晰，因此，可以通过增加CBS的数量来检测低丰度的mRNA。总的来说，韩风雨开发团队发明人了一种新的RNA工具，将其命名为VN-dCasE-VC，该控制系统能够活命巨噬细胞里面无法背景的特定RNA，通过发射光谱将其仿真。迄今为止已是两种活命巨噬细胞RNA成像工具，一种是MS2，一种是Cas13a，韩风雨开发团队开发的dCasE控制系统，成像效果由于MS2，而且，dCasE蛋白的分子量为22kDa，远小于Cas13a的130kDa，dCasE的小分子量更是容易递送至巨噬细胞内，因此更是适当用以活命巨噬细胞的RNA。一位比起韩风雨的人士问及：“这篇文章是此前韩风雨工作的延续，用意都是开发基因编辑工具。”不过，值得注意的是，该深入研究迄今为止刊出于亦同刻印的网站，尚擅自过不约而同评议，对此，有科研人士指出，首发在擅自不约而同评议的亦同刻印上，是为了获首发权。“韩风雨下一步还会投效年初学报的。”前述人士所述。不知道此次新的篇文章确实会再次给韩风雨造成了关注，2016年5年底，《连续性—生物学新科技》刊出韩风雨开发团队新的基因编辑新科技NgAgo，被大媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的故事原型炒作而走红，此后半年，韩风雨应有及其所在学院陆续获各类尊严和大量经费捐款，但亦有国外多名基因编辑应用科学家实名发声称实验结果难以重复，怀疑实验结果的可信。2017年8年底，《连续性—生物学新科技》刊出题为《是该样本说话的时候了》社论，宣布暂缓韩风雨开发团队于2016年5年底2日刊出在该学报的篇文章。2018年9年底，沧州新材料学院发布公告，韩风雨开发团队不长期存在主观造假。但依据有关规定，叫停韩风雨所获的荣誉称号，终止韩风雨开发团队承担的科研项目并收回科研经费。韩风雨开发团队对此称，实验设计长期存在缺陷、深入研究更进一步长期存在着不严肃的问题。有业界人士表示：“这波之后，NgAgo这个深入研究斜向在里面国做得比较慢。韩风雨他们的工作开展慢慢地也比较困难，连学生也无法新招。”